量子哈希
重组腺相关病毒（rAAV）是一种无致病性的单链DNA病毒，具有高转导效率和低免疫原性，可用于高效的基因递送。目前，基于rAAV的多种基因治疗产品已经上市，并取得了良好的疗效，因此rAAV成为了基因治疗领域备受关注的产品。那么，rAAV是如何生产的呢？目前主要有两种生产系统：一种是利用三质粒包装系统，在293细胞中瞬时转染产生病毒；另一种是利用杆状病毒感染昆虫细胞Sf9来生产rAAV病毒。这两种系统有何差异？在实验和临床应用中，哪种效果更好呢？
基于293细胞的rAAV包装系统是实验室和制药工业中最常用的方法之一。该系统利用三质粒转染293细胞，同时使用穿梭质粒、包装质粒和辅助质粒，最终获得rAAV病毒颗粒。美国FDA批准的Zolgensma和Luxturna两款rAAV基因治疗产品就是利用这种系统生产的。
另一种生产系统是利用杆状病毒感染Sf9昆虫细胞来生产rAAV病毒。Sf9细胞具有大量表达重组蛋白的能力，因此可以用于大规模生产rAAV。相比起依赖质粒转染的293细胞系统，Sf9细胞系统更安全，因为杆状病毒对哺乳动物和植物无致病性。欧洲药品管理局批准的Glybera就是利用Sf9昆虫细胞系统生产的rAAV病毒。
尽管这两种系统都被广泛应用，但它们在生产过程中存在一些差异。一项研究发现，这些差异主要体现在产生的杂质、衣壳蛋白的修饰以及体内和体外感染效率上。衣壳蛋白的修饰包括糖基化、乙酰化、磷酸化和甲基化等，而不同的系统产生的修饰方式也不同。此外，两种系统产生的rAAV空壳率和杂质也有所差异，293细胞系统产生的rAAV空壳率较低，而Sf9细胞系统产生的rAAV空壳率相对较高。此外，研究还发现，293细胞生产的rAAV具有更强的体内和体外感染能力。
综上所述，基于293细胞的rAAV包装系统可能具有更好的感染效率、更高的质量，并且具有更大的临床应用潜力。然而，Sf9细胞系统具有更高的rAAV包装产率，因此在解决上述问题后，也有潜力成为基因治疗载体生产的重要系统。和元生物拥有授权清晰的HEK293细胞系，可以对基于该细胞的rAAV生产系统进行优化和改进，开发出更好的rAAV生产体系。同时，和元生物使用自有的GMP级病毒包装质粒，致力于减少批次间差异、杂质和污染，提供高质量的基因递送产品。
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参考文献：
[1] Rumachik NG, Malaker SA, Poweleit N, Maynard LH, Adams CM, Leib RD, Cirolia G, Thomas D, Stamnes S, Holt K, Sinn P, May AP, Paulk NK. Methods Matter: Standard Production Platforms for Recombinant AAV Produce Chemically and Functionally Distinct Vectors. Mol Ther Methods Clin Dev. 2020 May 22;18:98-118. doi: 10.1016/j.omtm.2020.05.018. PMID: 32995354; PMCID: PMC7488757.
[2] Wang D, Tai PWL, Gao G. Adeno-associated virus vector as a platform for gene therapy delivery. Nat Rev Drug Discov. 2019 May;18(5):358-378. doi: 10.1038/s41573-019-0012-9. PMID: 30710128; PMCID: PMC6927556.
[3] Bulcha JT, Wang Y, Ma H, Tai PWL, Gao G. Viral vector platforms within the gene therapy landscape. Signal Transduct Target Ther. 2021 Feb 8;6(1):53. doi: 10.1038/s41392-021-00487-6. PMID: 33558455; PMCID: PMC7868676.
[4] Mueller C, Ratner D, Zhong L, Esteves-Sena M, Gao G. Production and discovery of novel recombinant adeno-associated viral vectors. Curr Protoc Microbiol. 2012 Aug;Chapter 14:Unit14D.1. doi: 10.1002/9780471729259.mc14d01s26. PMID: 22875565; PMCID: PMC4358842.
